微量DNA轉(zhuǎn)染試劑的原理基于細(xì)胞攝取外源DNA的能力和DNA分子在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)。試劑中所添加的特定分子可以有效地保護(hù)DNA分子，并增加其與細(xì)胞膜之間的親和性，從而提高DNA分子被細(xì)胞攝取的效率。試劑中的酸性環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)的酶則能夠促使DNA分子從脂質(zhì)復(fù)合物中被釋放出來，并進(jìn)入細(xì)胞核，實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染。
將這些DNA脂質(zhì)復(fù)合物添加到目標(biāo)細(xì)胞培養(yǎng)基中。通過一系列的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)步驟，DNA脂質(zhì)復(fù)合物會與細(xì)胞表面的負(fù)電荷分子相互作用，形成脂質(zhì)體和細(xì)胞膜之間的親和性。這種親和作用使得DNA脂質(zhì)復(fù)合物能夠與細(xì)胞膜相結(jié)合，并被細(xì)胞攝取。細(xì)胞將攝入的DNA脂質(zhì)復(fù)合物轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。
通過胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，DNA脂質(zhì)復(fù)合物被釋放出來。細(xì)胞質(zhì)中的酸性環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)酶的作用會導(dǎo)致DNA脂質(zhì)復(fù)合物的穩(wěn)定性降低，使之解離。DNA分子被釋放到細(xì)胞質(zhì)中，接下來進(jìn)入細(xì)胞核。在細(xì)胞核中，DNA分子可以與細(xì)胞的基因組相結(jié)合，或與核內(nèi)的蛋白相互作用，從而實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)或基因編輯。
微量DNA轉(zhuǎn)染試劑主要應(yīng)用于以下領(lǐng)域：
1.基因功能研究：將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，從而研究基因在細(xì)胞內(nèi)的功能及影響。
2.基因治療：將治療相關(guān)的基因載體輸送到目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)，以實(shí)現(xiàn)基因治療的目的。
3.基因編輯：將基因編輯相關(guān)的工具如CRISPR/Cas9系統(tǒng)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，以實(shí)現(xiàn)基因編輯。
4.逆轉(zhuǎn)錄病毒研究：將逆轉(zhuǎn)錄病毒的基因組導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，研究逆轉(zhuǎn)錄病毒感染機(jī)制及生命周期。
5.基因表達(dá)調(diào)控研究：將miRNA、siRNA等轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)，研究基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制。
